Gene di Resistenza à i Carbapenemi (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP)
Nome di u pruduttu
Kit di rilevazione HWTS-OT045 Gene di resistenza à i carbapenemi (KPC/NDM/OXA 48/OXA 23/VIM/IMP) (PCR à fluorescenza)
Epidemiologia
L'antibiotici carbapenemici sò antibiotici β-lattamici atipici cù u più largu spettru antibattericu è a più forte attività antibatterica. Per via di a so stabilità à a β-lattamasi è a bassa tossicità, hè diventatu unu di i medicinali antibatterici più impurtanti per u trattamentu di infezioni batteriche gravi. I carbapenemici sò assai stabili à e β-lattamasi à spettru allargatu mediate da plasmidi (ESBL), i cromusomi è e cefalosporinasi mediate da plasmidi (enzimi AmpC).
Canale
| PCR-Mix 1 | PCR-Mix 2 | |
| FAM | IMP | VIM |
| VIC/HEX | Cuntrollu Internu | Cuntrollu Internu |
| CY5 | NDM | KPC |
| ROX | OXA48
| OXA23 |
Parametri tecnichi
| almacenamentu | ≤-18℃ |
| Durata di conservazione | 12 mesi |
| Tipu di campione | Espettoratu, culonie pure, tampone rettale |
| Ct | ≤36 |
| CV | ≤5,0% |
| Livellu di Detezzione | 103UFC/mL |
| Specificità | a) U kit rileva e referenze negative standardizate di l'impresa, è i risultati rispondenu à i requisiti di e referenze currispondenti. b) I risultati di u test di reattività incruciata mostranu chì stu kit ùn hà micca reazione incruciata cù altri patogeni respiratori, cum'è Klebsiella pneumoniae, Acinetobacter baumannii, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pneumoniae, Neisseria meningitidis, Staphylococcus aureus, Klebsiella oxytoca, Haemophilus influenzae, Acinetobacter junii, Acinetobacter haemolyticus, Legionella pneumophila, Escherichia coli, Pseudomonas fluorescens, Candida albicans, Chlamydia pneumoniae, adenovirus respiratoriu, Enterococcus, o campioni chì cuntenenu altri geni resistenti à i farmaci CTX, mecA, SME, SHV, TEM, ecc. c) Anti-interferenza: Mucina, Minociclina, Gentamicina, Clindamicina, Imipenem, Cefoperazone, Meropenem, Cloridrato di Ciprofloxacina, Levofloxacina, Acidu Clavulanicu, Roxitromicina sò stati selezziunati per a prova d'interferenza, è i risultati mostranu chì e sustanze interferenti sopra menzionate ùn anu alcuna reazione interferente à a rilevazione di i geni di resistenza à i carbapenemi KPC, NDM, OXA48, OXA23, VIM è IMP. |
| Strumenti applicabili | Sistemi PCR in tempu reale Applied Biosystems 7500 Sistemi PCR in tempu reale QuantStudio®5 Sistemi PCR in tempu reale SLAN-96P (Hongshi Medical Technology Co., Ltd.) Sistema PCR in tempu reale LightCycler®480 Sistema di rilevazione PCR in tempu reale LineGene 9600 Plus (FQD-96A,HangzhouTecnulugia Bioer) MA-6000 Termociclatore Quantitativu in Tempu Reale (Suzhou Molarray Co., Ltd.) Sistema PCR in tempu reale BioRad CFX96 Sistema PCR in tempu reale BioRad CFX Opus 96 |
Flussu di travagliu
Opzione 1.
Reagente d'estrazione cunsigliatu: Kit Generale di DNA/RNA Macro & Micro-Test (HWTS-301)9-50, HWTS-3019-32, HWTS-3019-48, HWTS-3019-96) (chì pò esse adupratu cù Macro & Micro-Test Automatic Nucleic Acid Extractor (HWTS-3006C, HWTS-3006B)) da Jiangsu Macro & Micro-Test Med-Tech Co., Ltd.. Aghjunghjite 200 μL di soluzione salina nurmale à u precipitatu di tallu. I passi successivi devenu seguità l'istruzzioni per l'estrazione, è u vulume di eluzione cunsigliatu hè100 μL.
Opzione 2.
Reagente d'estrazione cunsigliatu: Reagente d'estrazione o di purificazione di l'acidu nucleicu (YDP302) da Tiangen Biotech (Pechino) Co., Ltd. L'estrazione deve esse iniziata in stretta cunfurmità cù u passu 2 di l'istruzzioni per l'usu (aghjunghje 200 μL di buffer GA à u precipitatu di tallu, è scuzzulà finu à chì u tallu sia cumpletamente suspesu). Aduprate l'acqua senza RNasi/DNasi per l'eluzione, è u vulume d'eluzione cunsigliatu hè 100 μL.
Opzione 3.
Reagente d'estrazione cunsigliatu: Reagente di liberazione di campione Macro & Micro-Test. U campione di sputum deve esse lavatu aghjunghjendu 1 mL di soluzione salina nurmale à u precipitatu di tallu trattatu sopra menzionatu, centrifugatu à 13000 r/min per 5 minuti, è u surnatante hè scartatu (tenite 10-20 µL di surnatante). Per culunie pure è tamponi rettali, aghjunghje 50 μL di reagente di liberazione di campione direttamente à u precipitatu di tallu trattatu sopra menzionatu, è i passi successivi devenu esse estratti secondu l'istruzzioni per l'usu.
